蛋白组学是研究细胞内所有蛋白质的集合,这包括它们的表达、功能和调节。在蛋白组学研究中,"标记"和"非标记"是两种主要的方法。
一、标记蛋白组学(Labelled Proteomics):
在这种方法中,蛋白质或其片段被化学标记,通常是为了量化。例如,通过质谱法,可以比较不同样本中蛋白质的相对丰度。常见的标记技术包括同位素标记(如硅酸盐标记和氨基酸稳定同位素标记)、荧光标记等。
图1.定量蛋白组分析
1、同位素标记(Isotope Labelling):
->B:质谱稳定同位素标记(Mass Spectrometry-based Stable Isotope Labelling):
->B:氨基酸稳定同位素标记(Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell culture, SILAC):
2、化学标记(Chemical Labelling):
->B:荧光标记(Fluorescent Labelling):
->B:活性基团标记(Reactive Group Labelling):
3.酶标记(Enzymatic Labelling):
例如,使用特定酶(如激酶)对蛋白质进行修饰,然后通过特定的方法检测这种修饰。
二、非标记蛋白组学(Label-free Proteomics):
这种方法不涉及直接标记蛋白质。它依赖于比较不同样本的质谱数据来分析蛋白质表达的变化。非标记方法的优点是它不需要复杂的化学处理,可以在更自然的状态下研究蛋白质。
图2.Label Free定量蛋白组学服务流程
1-.优势:
无需化学标记,简化了样本处理过程。
更适合分析大规模样本或复杂样本。
允许研究蛋白质在其zuì自然的状态下的表达。
2.应用:
广泛应用于疾病生物标志物的发现、蛋白质网络的研究、药物作用机理的探索等领域。
特别适用于那些难以使用标记方法的样本,如临床样本。
标记方法通常在定量分析中更精确,而非标记方法在处理大规模样本或复杂样本时可能更方便。
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